چکیده
این مطالعه، اثرات ایمنوژن پری بیوتیک روی لیزوزوم، TNFα و بیان ژن HSP70 فوق کلیه، پارامترهای ایمنی ذاتی هومورال و مقاومت به Aeromonas hydrophila در ماهی قزل آلای رنگین کمانی را بررسی میکند. 120 ماهی قزل آلای رنگین کمانی (81.65+_1.49g) در شش تانک فایبرگلاس در دو گروه تغذیهای بررسی شدهاند که یکی از آنها گروه شاهد و دیگری گروه آزمایش بودهاست که با 2g/kg از ایمنوژن به مدت 45 روز تغذیه شدهاست. نتایج نشان دادند که استفاده از ایمنوژن به طور قابل توجهی (p<0.05) باعث تنظیم بیشتر لیزوزیم و بیان ژن TNFα میشود. بیان ژن HSP70 به طور قابل ملاحظهای (p<0.05) در ماهیهایی که با ایمونوژن تغذیه شدهاند، در پایان آزمون پایینتر بودهاست. پارامترهای ایمنی ذاتی خونی (فعالیت لیزوزیم، ACH50 و اسیدیته باکتریایی) به طور قابل ملاحظهای (p<0.05) در 15 یا 45 روز بعد از تغذیه با رژیم غذایی حاوی ایمونوژن افزایش یافتهاست. اگرچه، افزایش قابل توجه (p<0.05) در تیتر آنتی بادی آگلوتیناسیون فقط 45 روز بعد از تغذیه با ایمونوژن افزایش مییابد. ماهیهای قزل آلای رنگین کمانی تغذیه شده با 2g/kg ایمنوژن، مقاومت بسیار بالاتری نسبت به A.hydrophila (میزان زنده ماندن 64.44%) نسبت به گروه کنترل (24.44%) نشان دادهاند. این نتایج تایید میکند که ایمونوژن میتواند بیان ژنهای مربوط به ایمنی را بیشتر تنظیم کند، پاسخ ایمنی را تحریک کند که در نهایت مقاومت به بیماری را در ماهیهای قزل آلای رنگین کمانی افزایش میدهد.
مواد و روشها
پرورش ماهی و آزمون خوراک دهی
120 ماهی قزل آلای رنگین کمانی (81.65+_1.49g) از پرورش ماهی در ماهی سرا (کرج، ایران) به دست آمدند و به آزمایشگاه بیماریهای شیلات در دانشگاه تهران منتقل شدند. بعد از چک کردن حالت سلامت، آنها به طور مساوی در شش محفظه فایبرگلاس نگهداری شدند (1000L) که دو سطح از ایمنوژن را با سه تکرار دریافت کردهاند ( 0 و 2 گرم به ازای هر کیلوگرم) (پری بیوتیک تجاری). ماهیها به مدت 10 روز در شرایط آزمایشگاهی نگهداری شدند و در طی نگهداری با (2% BW) با رژیم غذایی ماهیهای قزل آلای رنگین کمانی دو بار در روز تغذیه شدند. در طی یک آزمایش تجربی (5 هفته ای) ماهی دوبار در روز به صورت دستی تغذیه میشد (ساعت 9 صبح و 5 بعد از ظهر). نسبت غذا خوردن هر دو هفته یکبار و بعد از 24 ساعت گرسنگی تنظیم و وزن کشی انجام میشود. دمای آب، اکسیژن محلول و pH هر روز بررسی میشود و به ترتیب برابر با 18±1.2 °C، 6.6 ±0.3mg/L و 6.9±0.4 است.
آماده سازی رژیم
یک دوز تکی از ایمنوژن (2g/kg) در یک رژیم پایهای فرموله شده برای ماهی قزل آلای رنگین کمانی ادغام شدهاست (پروتئین خالص، 45.3%، چربی خالص 9.1%، انرژی ناخالص 20.4Mj/kg). اجزای رژیم با آب مخلوط میشوند تا یک خمیر را ایجاد کنند که سپس از یک چرخ گوشت عبور میکنند که با یک صافی 4.8mm تجهیز شدهاست تا ته نشستهای یکنواختی را ایجاد کند. رژیمهای ته نشستها در 40°C خشک میشوند و در کیسههای پلاستیکی در -4°C نگهداری میشوند تا زمانی که مورد استفاده قرار بگیرند.